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アプリケーションノート 2022<19>
製品名:MycoBlue Mycoplasma Detector(Cat.No.D101-01、D101-02)
メーカー名:Vazyme Biotech Co., Ltd.
製品名:MycoBlue Mycoplasma Detector(Cat.No.D101-01、D101-02)
メーカー名:Vazyme Biotech Co., Ltd.
下記のデータは、関西医科大学 がん多細胞コミュニケーション学社会連携講座 山家 良介 様のご厚意により掲載させていただきました。
概要
マイコプラズマは、細胞内に感染することで、細胞代謝などに影響を及ぼし、実験の結果にも影響を与える可能性がある。このため、細胞培養においてマイコプラズマをモニタリングすることが求められている。しかし、従来の方法ではPCR等で検出を行うため、作業に手間や時間がかかっている。
MycoBlue Mycoplasma Detectorは、PCRやqPCRの操作が不要で、反応溶液の色調変化によりマイコプラズマの汚染を迅速に目視で検出できるキットである。なお、感度は5×105 cfu/mLであり、日々の簡易確認試験等に使用することを想定した製品である。
本資料は、多種のサンプルでマイコプラズマの検出を行った運用方法の事例である。
評価方法

製品紹介
サンプル
以下の細胞培養液をサンプルとして使用した。
細胞名 | Mewo | SCC-25 | HSC-3 | HMMME | HT-29 | 口腔線維芽 | HCC-1937 |
---|---|---|---|---|---|---|---|
動物種 | ヒト | ヒト | ヒト | ヒト | ヒト | ヒト | ヒト |
由来 | 皮膚 メラノーマ |
口腔 扁平上皮癌 |
口腔 扁平上皮癌 |
胸膜 中皮腫 |
大腸 腺癌 |
口腔 線維芽細胞 |
乳腺 乳癌 |
培地 | E-MEM | F-12+DMEM | E-MEM | F-12 | McCoy’s 5a | D-MEM | RPMI1640 |
FBS | 10% | 10% | 10% | 15% | 10% | 15% | 10% |
抗生物質 (ペニシリン/ストレプトマイシン) |
(-) | (-) | (-) | (-) | (-) | (-) | (-) |
細胞名 | KPL-1 | T47D | MDCK | HCT-116 | C17 | Sf9 | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
動物種 | ヒト | ヒト | イヌ | ヒト | マウス | ヨトウガ | |
由来 | 乳腺 乳癌 |
乳腺 乳癌 |
腎臓 尿細管上皮 |
結腸 腺癌 |
脳 神経幹細胞様 |
卵巣 | |
培地 | D-MEM | D-MEM | D-MEM | McCoy’s 5a | D-MEM | Sf-900 | |
FBS | 10% | 10% | 10% | 10% | 10% | 5% | |
抗生物質 (ペニシリン/ストレプトマイシン) |
(-) | (-) | (-) | (-) | (-) | (-) |
結果
チューブNo. | 細胞名 | 結果 |
---|---|---|
1 | Negative Control | - |
2 | Mewo | - |
3 | SCC-25 | - |
4 | HSC-3 | - |
5 | HMMME | - |
6 | HT-29 | - |
7 | 口腔線維芽 | - |
8 | HCC-1937 | + |
9 | Positive Control | + |
チューブNo. | 細胞名 | 結果 |
---|---|---|
1 | Negative Control | - |
2 | KPL-1 | + |
3 | T47D | - |
4 | MDCK | + |
5 | HCT-116 | - |
6 | C17 | + |
7 | Sf9 | - |
8 | Positive Control | + |
まとめ
培養細胞の種類によらず反応溶液の色調の対比でPositive/Negative判定が可能であった。
今後、日々の検査で使用可能と思われますが、当研究室には高価な細胞株があまりないため、コンタミ疑い時は廃棄処分になります。学生が長期培養時に簡易確認試験で使える可能性はあると思います。
この記事で紹介した製品
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- 製品情報詳細ページ:MycoBlue Mycoplasma Detector(Cat.No. D101-01、 D101-02)
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