【製品性能評価】Vazyme Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix 製品評価

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発売したばかりの新製品の性能評価や、既存製品の最適な条件を追求するための条件検討をすることでお客様に心からご納得頂いた上で商品をお使い頂けるよう、様々な評価試験を行っています。
採用前の検討資料として、または採用後の最適条件検討資料としてご活用ください。
また、当データに関するご質問はお気軽にページ下部のフォームよりお問い合わせください。

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背景

Vazyme Biotech社 Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mixは、ROXがプレミックスされており、ROX補正が必要な様々なリアルタイムPCR装置はもちろん、ROX補正の必要のない装置でも使用できるSYBR試薬である。
また、一般的に使用されるSYBR試薬より蛍光強度が高く、S/N比を使用して補正を行う装置では、きれいなデータが得られる利点もある。
本資料では、研究室で多く使用されている一般的なSYBR試薬とTaq Pro Universal SYBR qPCR Master Mixが、同等の性能であるか比較検証を行った。

実験条件

• 評価試薬
  Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix（Vazyme Biotech Co., Ltd. / Cat.No. Q712-02）
  TY社 SYBR qPCR Mix
• 使用装置
  LightCycler^® 96 System（ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社 / Cat.No. 05815916001, 以下LC96）
  QuantStudio 5（Thermo Fisher SCIENTIFIC, 以下QS5）
• サンプル
  Human Genomic DNA; Male（Promega / Cat.No. G1471）
  5 ng/μL, 1 ng/μL, 0.2 ng/μL, 0 ng/μL（Negative Control）に希釈を行い、使用した。
• Primer
  human beta-actin / amplicon 295 bp
  　Forward : TCACCCACACTGTGCCCATCTACGA
  　Reverse : CAGCGGAACCGCTCATTGCCAATGG
  human insulin / amplicon 132 bp
  　Forward : AGAGGGGTGGTGAGTCTGTG
  　Reverse : GCCAAAACAGGCTACTTTGCT
• 反応組成
  

  LightCycler 96

  

  QuantStudio 5

  
  * QuantStudio 5は、ROX補正が必要な機器のため、TY社試薬付属 50x ROX reference dyeを使用した。

• 反応プログラム
  

  LightCycler 96

  

  QuantStudio 5

  
  * TY社の試薬は、機種によりプログラムが異なるため、取扱説明書に従いqPCRを行った。

結果

RAWデータ

	Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix	TY社SYBR qPCR Mix
LC96
QS5

ーhuman beta-actin ーhuman insulin

RAWデータでは、蛍光強度の上限がTY社SYBR qPCR Mix より、Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix の方がかなり高い数値となった。

Analysisデータ

	Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix	TY社SYBR qPCR Mix
LC96
QS5

ーhuman beta-actin ーhuman insulin

TY社SYBR qPCR Mix、Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mixともにきれいな波形が認められた。

Cq値

VazymeとTY社を比較し、Cq値に大きな差は認められなかった

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