FFPEサンプルから抽出したDNAのNGS解析に最適なワークフローを実現
FFPE(ホルマリン固定パラフィン包埋)サンプルから抽出したDNAの品質チェックができるKAPA NGS FFPE DNA QC Kitが新発売!こちらはKAPA Human Genomic DNA Quantification Kit(2022年6月販売終了)の後継品となります。
同時に、DNAを抽出するためのKAPA NGS DNA Extraction Kitと脱アミノ化されたシトシンを除去するためのKAPA NGS FFPE DNA Polishing Kitが発売されます。
今回発売となる3つのキットで、FFPEサンプルからのDNA抽出・クオリティチェック・脱アミノ化シトシン除去を一連のフローで実施が可能となります。
KAPA NGS DNA Extraction Kit
- 新しく開発された耐熱性proteaseを使用し、10 µmのFFPE切片1-2枚からDNAを抽出します。
- 脱パラフィンによく使用されるキシレンは使用しません。
- 精製にはKAPA HyperPure Beads(別途ご用意ください)を用い、カラムを使用しません。
- KAPA HyperPETE Somatic Tissue DNA Workflowで使用します。
製品情報
CatNo. | 製品名 | 単位 | 価格(税抜き) |
---|---|---|---|
09189823001 | KAPA NGS DNA Extraction Kit | 24 rxn | ¥12,000 |
09190023001 | KAPA NGS DNA Extraction Kit | 96 rxn | ¥36,000 |
※価格は2022年4月現在のものです。
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KAPA NGS FFPE DNA QC Kit
- FFPE サンプルから抽出したDNAの品質を、Q-scoreとして評価できるDNA Quality control (QC)キットです。
- 算出したQ-scoreは、KAPA HyperPETE Somatic Tissue DNA Workflowにおいて、最適なインプットDNA量を算出するために使用します。
- Q-scoreは、qPCRを用いてDNA上の長短2種類の領域(191 bp、66 bp)の量比を算出した値です。その値は、0から1で評価され、値が1に近いほど、DNAの品質が高いことを意味します。
- 評価に使用する使用量はわずか1 µLであり、サンプル全体のわずか1/40しか使用しません。
製品情報
CatNo. | 製品名 | 単位 | 価格(税抜き) |
---|---|---|---|
09217193001 | KAPA NGS FFPE DNA QC Kit | 24 rxn | ¥72,000 |
※価格は2022年4月現在のものです。
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KAPA NGS FFPE DNA Polishing Kit
FFPE検体として保存されていたサンプルのDNAは、脱アミノ化により、シトシン(C)からウラシル(U)への塩基置換が起こる場合があります。この置換により生じたUは、PCRに伴いT 変換されるため、C>T(もしくはG>A)シーケンスエラーの原因となり、バリアントコールする際のノイズになります。KAPA NGS FFPE DNA Polishing Kitは、このウラシルを有するDNAを酵素を用いて除去、分解するキットです。これにより、FFPE検体でみられる脱アミノ化シトシン由来のアーティファクトを軽減します。
製品情報
CatNo. | 製品名 | 単位 | 価格(税抜き) |
---|---|---|---|
09217215001 | KAPA NGS FFPE DNA Polishing Kit | 24 rxn | ¥18,000 |
09217223001 | KAPA NGS FFPE DNA Polishing Kit | 96 rxn | ¥54,000 |
※価格は2022年4月現在のものです。
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KAPA HyperPETE Somatic Tissue DNA Workflow
KAPA HyperPETE Somatic Tissue DNA Workflowは、KAPAライブラリー調製試薬およびKAPAターゲットエンリッチメントキットを使用するDNAライブラリー調製ワークフローです。このフローで必要となる、すべてのアクセサリーや試薬は製品として提供しています。
KAPA NGS DNA Extraction Kit
FFPEサンプルからのDNA抽出/精製に使用します。この工程で得られたDNAは、精製DNAの品質評価工程(Q-score derived FFPET hgDNA工程)、およびその後のライブラリー調製に使用します。
KAPA NGS FFPE DNA QC Kit
KAPA NGS DNA Extraction kitで抽出/精製したDNAの品質評価工程(Q-score derived FFPET hgDNA工程)で使用します。
KAPA NGS FFPE DNA Polishing Kit
脱アミノ化シトシンの除去は、精製DNAの品質評価した後に実施します。DNA polishing後には、精製を必要とすることなく、ライブラリー調製のDNA断片化行程に使用できます。
この記事でご紹介した製品
より詳しい資料・取扱説明書などは下記リンクより製品詳細ページをご覧ください。