【製品性能評価】FastGene™ PAGE Gel における最大インプット量と泳動バッファーの評価試験

日本ジェネティクスのテクニカルノートとは？

発売したばかりの新製品の性能評価や、既存製品の最適な条件を追求するための条件検討をすることでお客様に心からご納得頂いた上で商品をお使い頂けるよう、様々な評価試験を行っています。
採用前の検討資料として、または採用後の最適条件検討資料としてご活用ください。
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テクニカルノート2018＜10＞
製品名：FastGene™ PAGE Gel（Cat.No. NE-PGS420）

目的

① 本製品と既存の製品において、最大インプット量※1について検証を行う。
② 本製品の推奨Buffer（MOPS Buffer）以外で泳動した場合の結果を確認する。

※1：1ウェルあたりにアプライできる最大溶液量

評価方法

① それぞれのゲルのウェルにサンプルバッファーをインプットする。
　ウェルから溢れるまで入れることで、最大インプット量※1の検証を行う。
② 推奨Buffer（MOPS Buffer）とTris-Glycine Bufferによる泳動の差を確認する。
※1：1ウェルあたりにアプライできる最大溶液量

概要

既存製品の仕様比較

メーカー	FastGene™	B 社	C 社
ゲル
ゲルカセットサイズ	8.3 cm × 10 cm	8 cm × 10 cm	10 cm × 10 cm
ゲル厚	4.62 mm	4.62 mm	3.20 mm
コーム厚	1.44 mm	1.05 mm	0.83 mm
電圧または電流 ※2	140 V	200 V	200 V または30 mA
推奨Buffer ※2	MOPS Buffer	Tris-Glycine Buffer	Tris-Glycine Buffer
時間 ※2	55 min	30 min	60 min
※2：泳動条件は、全てメーカーの取扱説明書に記載の条件です。

実験① －最大インプット量の確認

インプットする溶液：Laemmli サンプルバッファー（BioRad, Cat.No.1610737）

サンプルバッファーをそれぞれのウェルに左図のようにインプットを行い、ウェルから溢れるまで入れた。
ウェルから溢れなかった最大のインプット量を最大インプット量とした。

メーカー	FastGene™	B 社	C 社
ウェル数	12	12	13
最大インプット量※3	60 μL	20 μL	25 μL
※3：取扱説明書記載量

メーカー（ゲル厚）	FastGene™ （ 4.62 mm）	B社（4.62 mm）	C社（3.20 mm）
最大インプット量	60 μL	20 μL	25 μL
検証結果
実際の最大インプット量	最大60 μL	最大30 μL	最大30 μL
※4：C社のゲルにおいて、ウェルのガイドを見やすくするためにラインを引きました。実際の製品には黒いラインはありません。

本製品は、取り扱い説明書通り最大60 μLまでインプットすることができた。

実験② －推奨BufferとTris-Glycine Bufferによる泳動の差

FastGene™ PAGE Gel（Cat.No. NE-PGS420）とプレステインマーカーを用いて推奨のMOPS BufferとTris-Glycine Bufferによる違いを検証した。
マーカーは、BLUE Star Prestained Protein-Ladder（Cat.No. NE-MWP03）とBLUE Star PLUS Prestained Protein-Ladder（Cat.No. NE-MWP04）を使用し、各5 μL/Laneで等量分注した。

Buffer	推奨Buffer MOPS Buffer	Tris-Glycine Buffer
FastGene™ PAGE ゲル
結果	電気泳動でプレステインマーカーが展開されて、バンドを確認できた。	150 V,50 minで電気泳動を行ったが、プレステインマーカーのバンドは確認できなかった。このため、追加で電気泳動を行ったが、やはりバンドは確認できなかった。