日本ジェネティクスのアプリケーションノートとは？
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| アプリケーションノート 2018＜21＞ 製品名：モバイル リアルタイムPCR装置（PicoGene® PCR1100） メーカー名：日本板硝子株式会社 |
下記データは、東京大学 医科学研究所 ウイルス感染分野 渡辺登喜子 先生のご厚意により掲載させていただきました。
実験概要
海外の実験装置が揃っていない場所や、高度封じ込め施設内において、サンプリング後、すぐに解析できるか実験を行った。
実験材料
ウイルス感染させたフェレットの鼻腔洗浄液から抽出したウイルスRNAサンプルを、逆転写反応に使用した。
ターゲット ： H7N9亜型インフルエンザウイルス RNA
RNA抽出キット： QIAamp viral RNA miniキット（Qiagen）
逆転写酵素 ： Surper ScriptIII
● 反応組成
| Template Enzyme（KAPA 3G Plant PCR Kit） Buffer Primer Mix Probe Mix |
6.5 μL 0.6 μL 8.5 μL 0.7 μL（800 nM） 0.7 μL（70 nM） |
| Total | 17 μL |
● 反応プログラム
| Hot Start Denature Anneling Cycles |
95℃／ 15 sec 95℃／ 5 sec 62℃／ 20 sec 45 cycles |
● 使用したプライマーとプローブ
| H7遺伝子 Primer（F）5’-AGAAATGAAATGGCTCCTGTCAA-3’ Primer（R）5’-GGTTTTTTCTTGTATTTTTATATGACTTAG-3’ Probe（FAM/BHQ-1）5’-AGATAATGCTGCATTCCCGCAGATG-3’ |
| IAV遺伝子 Primer（F）5’-CCMAGGTCGAAACGTAYGTTCTCTCTATC -3’ Primer（R）5’-TGACAGRATYGGTCTTGTCTTTAGCCAYTCCA-3’ Probe（HEX/BHQ-1）5’-ATYTCGGCTTTGAGGGGGCCTG-3’ |
結果
サンプル＃３ |
計測時間：21 min 40 sec ● FAM B |
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- 製品情報詳細ページ： モバイル リアルタイムPCR装置 PicoGene® PCR1100
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使いやすい印象で、海外の実験設備の整っていない場所での測定や、高度封じ込め施設内での測定に使用できると判断しました。