【お客様事例】バンバンカーDMSO FreeによるRAW264細胞の保存事例

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下記のデータは、日本ベルム株式会社 R&D部 小笠原明彦 様の御厚意により掲載させていただきました。

評価方法

■ 細胞培養条件
　使用した細胞：RAW264（マウス由来マクロファージ様細胞）
　培地：RPMI-1640 Medium（L-グルタミン、HEPES、カナマイシン、ペニシリンを含む）
　　　　＋10% FBS
　　　　● RPMI-1640培地（Sigma-Aldrich,R8758-500 ML）
　　　　● HEPES（富士フイルム和光純薬株式会社, 340-01371）
　　　　● カナマイシン硫酸塩（富士フイルム和光純薬株式会社, 113-00343）
　　　　● ベンジルペニシリンカリウム（富士フイルム和光純薬株式会社, 023-07731）
　　　　● Fetal Bovine Serum, qualified, Australia（Thermo Fisher Scientific,
　　　　　10099141）
　インキュベーター：37℃, 5％CO₂, 湿度90％

■ 凍結時の方法
　培養したRAW264細胞（生存率95～99%）を遠心後、5.5×10^6 cells/mLとなるように
　バンバンカーDMSO Freeにて懸濁
　→ 凍結チューブに1 mLずつ分注
　→ 凍結チューブを、バイセル（日本フリーザー株式会社）の中に入れて-80℃のフリーザーで凍結
　→ -80℃のラックに移して保管。一部のサンプルは、-150℃に移して保管

■ 解凍後の細胞生存率
　生存率の測定方法：トリパンブルー染色とC-Chipを用いた顕微鏡での目視による測定

結果

保存期間が長くなったり、保存状態が悪い（-80℃で開閉が多いフリーザー）と生存率が下がりますが、特に問題無く保存が出来ています。また、30世代まで継代を行うことができました。

この記事で紹介した製品

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